一、革兰氏染色的原理
1、G＋细胞壁主要由肽聚糖形成的致密网状结构组成，壁厚，类脂含量低，交联度高，用乙醇处理后，发生脱水作用，肽聚糖层孔径缩小，透性降低，从而使结晶紫-碘复合物不易被洗脱而保留再细胞内，故细菌仍保留初染时的紫色。
2、G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多类脂质，故用乙醇处理后，类脂质被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞被脱色，经沙黄复染后呈红色。
二、革兰氏染色的步骤
1、制片
涂片——干燥——固定
2、初染
滴加结晶紫染色1~2分钟，水洗；
3、媒染
用碘液冲去残水，并用碘液覆盖1分钟；
4、脱色
滴加95%酒精，脱色30秒，立即水洗；
5、复染
用番红液复染1~2分钟，水洗；
6、镜检
干燥后，用油镜观察。先低倍镜再高倍镜。油镜使用结束后，要及时用擦镜纸擦干净镜头，避免香柏油残留。
革兰氏染色原理及步骤 扩展
革兰染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。未经染色的细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难区别。
经染色后，阳性菌呈紫色，阴性菌呈红色，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，从而用以分类鉴定。染色原理：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细菌细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，再用95%乙醇脱色。
